BSP（Bisulfite Genomic Sequence）技術(shù)是提取的基因組DNA，經(jīng)過NaHSO3處理后，未甲基化CpG中“C”會轉(zhuǎn)換成“T”；而甲基化CpG中的“C”依然保持“C”，通過設(shè)計BSP引物，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，測序，從而確定CpG中甲基化數(shù)目及位置。目前主要用于啟動子中CpG甲基化程度高低與基因表達(dá)之間的關(guān)系研究。
基本流程：
技術(shù)優(yōu)勢：
（1）?????? 本公司在未知基因啟動子克隆方面，具有豐富的經(jīng)驗。目前已完成了團(tuán)頭魴、蜥蜴、菊花、香草、中國對蝦、三疣梭子蟹等眾多的物種基因啟動子調(diào)取工作，為分析CpG島以及CpG甲基化與表達(dá)調(diào)控研究打下基礎(chǔ)。
（2）?????? 目前，國內(nèi)外試劑盒C-T轉(zhuǎn)換試劑盒的效率與實際宣傳有一定差距，本公司對試劑盒進(jìn)行了系統(tǒng)改進(jìn)，使得C-T轉(zhuǎn)換效率達(dá)到99%以上。
（3）?????? BSP-PCR中最難的是引物的設(shè)計及優(yōu)化，本公司經(jīng)過多年的積累，在引物的設(shè)計方面具有極為豐富的經(jīng)驗。
客戶須知：
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CpG甲基化BSP-PCR技術(shù)服務(wù) |
周期 |
最終提供客戶資料 |
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CpG甲基化BSP-PCR技術(shù)服務(wù) |
14-21個工作日，視樣品和基因數(shù)目而定。 |
詳細(xì)實驗總結(jié)報告（包括基因組DNA提取、C-T轉(zhuǎn)換、PCR擴(kuò)增、電泳、測序、BiQAnalyzer分析結(jié)果等）。 ? |
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案例：
本實驗，首先通過啟動子克隆技術(shù)分別獲取甘肅鼢鼠和高原鼢鼠某基因上游的啟動子，通過http://www.urogene.org/cgi-bin/methprimer/methprimer.cgi在線尋找該啟動子的CpG區(qū)域，然后通過對BSP-PCR技術(shù)對不同海拔該基因啟動子甲基化程度進(jìn)行分析，從中找到膚色變化與該基因啟動子甲基化程度的關(guān)系，部分實驗結(jié)果如下：
客戶提供：
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樣品類型 |
組織樣本 |
細(xì)胞樣品 |
基因組DNA |
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樣品需要量 |
≥100 -200 mg |
≥5-10×106個 |
≥2.0 ug |
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取樣和保存環(huán)境 |
新鮮；-80℃凍存或存于組織保存液中 |
新鮮；-80℃凍存或存于組織保存液中 ? |
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運輸 |
杭州市內(nèi)干冰上門取樣； 外地客戶干冰快遞運輸。 |
杭州市內(nèi)干冰上門取樣； 外地客戶干冰快遞運輸。 ? |
杭州市內(nèi)干冰上門取樣； 外地客戶干冰快遞運輸。 ? |
*（經(jīng)本公司評估后，實驗沒有結(jié)果，不收取任何費用）
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0571-86913236
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